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关于3M测试片的接种的使用及判读方法
发布:2022-05-06 浏览:

3M测试片是美国3M公司研发的一种快速测试片。3M测试片相比传统测试方法,大大的缩短了检测工作时间,省略了培养基配制、高压灭菌、平板倾注等繁琐步骤,工作效率大幅提高,并且由于品质的稳定均一,克服了传统测试方法存在的使用培养基批次不同、配置条件不同、配置人员不同而导致的差异性。3M快速测试方法得到了包括AOAC在内的多个机构的认证,在全球许多地方已获官方机构的正式批准,从而可以确保检测结果的可靠性和世界各地的广泛认可。

3M测试片包括菌落总数、大肠菌群、大肠菌群/大肠杆菌、金黄色葡萄球菌霉菌和酵母菌、环境李斯特等很多种类。

3M菌落总数测试片

1、操作方法

①未开封时,置于≤8℃冷藏,注意外包装上的保存期限,打开包装时,应在室温条件下。已开封的,应用压条或胶带封口后,置于室温,一个月内用完。

②称取样品置于无菌均质袋或均质杯中,加入无菌稀释液搅拌或均质样品,并用稀盐酸或稀氢氧化钠调pH至6.5~7.2。

注意:无菌稀释液不可使用含有柠檬酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液,这些稀释液会阻碍细菌的生长。

③将测试片置于平坦表面处,保持水平,揭开上层膜,移液器或滴管吸1ml样液垂直滴加在测试片的正中央。然后将上层膜慢慢落下,尽量不要出现气泡,切勿向下滚动上层膜。

④将压板的圆形内凹面朝下,放置在上层膜的正中央,然后轻轻压下,使样液均匀覆盖于圆形的培养基面积上,切不可扭转压板。

⑤拿起压板,静置1min以上等待培养基凝固。然后测试片的透明面朝上,最多可叠放20片,置于36℃培养48小时,并保持培养箱的湿度。

2、判读方法

①菌落总数测试片内,含有一种红色指示染剂,可以使菌落呈现红色便于计数,计算所有红色菌落,不论大小及颜色深浅。

②测试片菌落计数的适宜计数范围是25~250。

③测试片的计数面积约为20cm2。每一个黄色方框的面积是1cm2。当菌落总数超过250个时,为了估计菌落数,可以选择其中一个或几个有代表性的小方框(1cm2)。计算平均菌落数,然后再乘以20可得到测试片上的菌落数。

④当测试片上的菌落太多而无法进行计数时,记录为“TNTC”。

⑤有很高数量的菌落,使整个生长区域变成粉色,或仅仅在生长边缘区域观察到单个菌落,记录为“TNTC”。

⑥有很高的菌落数量,并且有时菌落会出现分布不均匀的情况,记录为“TNTC”。

⑦可以看到直径较大的菌落,并且可以计数,但是仔细观察时,会发现非常密集非常细小的菌落分布在计数区域内,此时记录为“TNTC”。

⑧很少数量的菌种,会将测试片上的培养基液化,在计数区域内出现一个粉红色的液化区,此时不要记录液化区内的红点,应选择没有被液化区域内的菌落进行计数,选取没有液化部分的几个有代表性的小方格(1cm2)。计算平均菌落数,然后乘以20。得到结果。

⑨注意和样品残渣颗粒进行区。有些样品中会含有一些红色的残渣颗粒,菌落应该是红色规则的圆形,而颗粒的形状是不规则的。如果样品以红色颗粒为主(比如辣椒粉),这类样品的菌落总数检测,不宜采用3M菌落总数测试片。


3M大肠杆菌/大肠菌群测试片


1、操作方法 

操作方法与3M菌落总数测试片基本相同,只是不需要压板,直接把1ml样液加到中间红色圆形区域内,然后将上层膜轻轻放下,尽量不要产生气泡。然后可以轻轻的转动一下纸片,使样液可以均匀地分布在中间红色的圆形区域内。

2、判读方法

大肠菌群在纸片上呈现红色菌落,紧贴着菌落有气泡,大肠杆菌在纸片上呈蓝色菌落紧贴菌落有气泡。此时应注意区分只有红色或蓝色菌落而没有气泡的情况,或者气泡不是紧贴着菌落,或者只有气泡无菌落生长,都不应列入计数范围。此外还应区别样品残渣和目标菌落。

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